? ? ? ?ZL-620C信息化集成化信號(hào)采集處理系統(tǒng)的功能多樣性允許一套系統(tǒng)用于多種生命科學(xué)的研究,直觀而功能強(qiáng)大的軟件,可以幫助研究人員得到更多的,根據(jù)實(shí)驗(yàn)記錄得到數(shù)據(jù)之外的數(shù)據(jù)。ZL-620C信號(hào)采集處理系統(tǒng)作為一臺(tái)先進(jìn)的儀器,改變了許多實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)、方法和步驟,其作用不但在生命科學(xué)的研究方面得以體現(xiàn),并為廣大科研工作者所接受,使得學(xué)生創(chuàng)新思維及動(dòng)手能力的培養(yǎng)得到很大程度的提高。 ? ? ??
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? ? ??【心室期前收縮與代償間歇及不應(yīng)期的測(cè)定】
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹???
?本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察在心臟活動(dòng)的不同時(shí)期給予刺激,以驗(yàn)證心肌的興奮性周期性變化的特征。
【實(shí)驗(yàn)原理】
心肌每興奮一次,其興奮性就發(fā)生一次周期性的變化。心肌興奮性的特點(diǎn)在于其有效不應(yīng)期特別長(zhǎng),約相當(dāng)于整個(gè)收縮期和舒張?jiān)缙?。因此,在心臟的收縮期和舒張?jiān)缙趦?nèi),任何刺激均不能引起心肌興奮而收縮,但在舒張?jiān)缙谝院?,一次較強(qiáng)的閾上刺激就可以在正常節(jié)律性興奮到達(dá)以前,產(chǎn)生一次提前出現(xiàn)的興奮和收縮,稱(chēng)之為期前收縮。同理,期前收縮也有不應(yīng)期。因此,如果下一次正常的竇性節(jié)律性興奮到達(dá)時(shí)正好落在期前收縮的有效不應(yīng)期內(nèi),便不能引起心肌興奮和收縮。這樣,在期前收縮之后就會(huì)出現(xiàn)一個(gè)較長(zhǎng)的舒張期,這就是代償間歇。
【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】
? ? 蟾蜍。
【實(shí)驗(yàn)器材】
蛙類(lèi)解剖手術(shù)器材、蛙釘、蛙板、林格液、鐵支架、張力換能器、培養(yǎng)皿、滴管、蛙心夾、微調(diào)固定器、刺激電極、ZL-620C集成化信息化信號(hào)采集處理系統(tǒng)。
【方法和步驟】
1.?蟾蜍心室期前收縮與代償間歇的觀察
(1)?蛙心標(biāo)本:可采用在體蛙心標(biāo)本或離體蛙心標(biāo)本。在體蛙心標(biāo)本制作簡(jiǎn)易,但離體蛙心標(biāo)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果較典型。1)?在體蛙心標(biāo)本:①取蟾蜍一只,破壞腦和脊髓,將其仰臥固定于蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開(kāi)(或剪掉),然后剪掉胸骨,打開(kāi)心包,暴露心臟。②將與張力換能器有連線的蛙心夾在心室舒張期夾住心尖。將刺激電極固定,使其兩極與心室相接觸。③按圖1連接線路,張力換能器接ZL-620C第一通道(亦可選擇其他通道)。刺激電極與心室接觸良好,連接ZL-620C刺激輸出。
2)?離體蛙心標(biāo)本:離體蛙心標(biāo)本的制備見(jiàn)"離體蛙心灌流"實(shí)驗(yàn)。將與張力換能器有連線的蛙心夾經(jīng)滑輪在心室舒張期夾住心尖。將刺激電極固定,使其兩極與心室相接觸。按圖2連接線路,張力換能器接ZL-620C第一通道(亦可選擇其他通道)。刺激電極與心室接觸良好,連接ZL-620C刺激輸出。
(2)?打開(kāi)計(jì)算機(jī),啟動(dòng)ZL-620C集成化信息化信號(hào)采集處理系統(tǒng)。點(diǎn)擊ZL-620C菜單“實(shí)驗(yàn)/常用生理學(xué)實(shí)驗(yàn)”,選擇“期前收縮與代償間歇”。ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數(shù)如表1所示。
(3)?實(shí)驗(yàn)觀察
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?圖2-11-1??在體蛙心期前收縮實(shí)驗(yàn)儀器連接方法
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?圖2??離體蛙心期前收縮實(shí)驗(yàn)儀器連接方法
1)?描記正常蛙心的搏動(dòng)曲線,觀察曲線的收縮相和舒張相。
2)?用中等強(qiáng)度的單個(gè)閾上刺激分別在心室收縮期和舒張?jiān)缙诖碳ば氖?,觀察能否引起期前收縮。
3)?用同等強(qiáng)度的刺激在心室舒張?jiān)缙谥蟠碳ば氖?,觀察有無(wú)期前收縮的出現(xiàn)。表1??ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數(shù)
采樣參數(shù)刺激器參數(shù)顯示方式記錄儀刺激模式單刺激采樣間隔2ms延時(shí)1msX軸顯示壓縮比50:1波寬1~5ms通道通道1通道4幅度3~5VDC/ACDC記錄刺激標(biāo)記?處理名稱(chēng)張力刺激標(biāo)記放大倍數(shù)50~1005~50Y軸壓縮比4:164:1
4)?刺激如能引起期前收縮,觀察其后是否出現(xiàn)代償間歇(圖3)。

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?圖3?? 期前收縮和代償間歇注:箭頭表示給予刺激
?2.心肌有效不應(yīng)期的測(cè)定
(1)制備離體蛙心標(biāo)本:根據(jù)離體蛙心灌流的方法插好蛙心套管,并游離出胸腔,懸掛固定于鐵支架。
(2)用焊接有細(xì)導(dǎo)線的蛙心夾夾住蛙心尖部,用另一細(xì)導(dǎo)線置于蛙心插管的林格液內(nèi)。此兩線與ZL-620輸入線相連,以記錄心電活動(dòng)。
(3)安置刺激電極:剪去蛙心靜脈竇,將一對(duì)針形電極置于心室,接刺激輸出線起搏心臟。
(4)啟動(dòng)ZL-620C集成化信息化信號(hào)采集處理系統(tǒng)。點(diǎn)擊ZL-620C菜單"實(shí)驗(yàn)/常用生理學(xué)實(shí)驗(yàn)",選擇"心肌有效不應(yīng)期"。設(shè)置ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數(shù)(表2)。
(5)實(shí)驗(yàn)觀察
1)改變刺激強(qiáng)度,找出起搏蛙心的閾強(qiáng)度。
2)用2倍閾強(qiáng)度刺激蛙心,起搏心臟,記錄起搏蛙心的心電曲線。
3)每10個(gè)左右正常起搏后,將主周期刺激的脈沖數(shù)設(shè)為2,即插入一個(gè)額外刺激,引起心室發(fā)生額外興奮。調(diào)節(jié)主周期刺激的脈沖間隔,使間隔時(shí)間逐步縮短。當(dāng)間隔時(shí)間縮短到某一值時(shí),脈沖2不再引起心室額外興奮,此間隔時(shí)間即為蛙心心室肌的有效不應(yīng)期。表2???ZL-620C放大器、采樣和刺激器參數(shù)表
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【注意事項(xiàng)】
1.?破壞蛙的腦和脊髓要完全。
2.?蛙心夾與張力換能器間的連線應(yīng)有一定的緊張度。
3.?注意滴加林格液,以保持蛙心適宜的環(huán)境。
【思考題】
1.?在心臟的收縮期和舒張?jiān)缙诜謩e給予心室一個(gè)中等強(qiáng)度的閾上刺激,能否引起期前收縮?為什么?
2.?在期前收縮之后,為什么會(huì)出現(xiàn)代償間歇?在什么情況下期前收縮之后可以不出現(xiàn)人償間歇?
3.?心肌存在不應(yīng)期的實(shí)驗(yàn)依據(jù)是什么?
4.?測(cè)定心肌不應(yīng)期是否必須對(duì)心臟進(jìn)行人工起搏??
審核編輯:符乾江
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